

一、初始設(shè)置
收到蛋白循環(huán)反應(yīng)儀后,請仔細(xì)檢查外包裝,確保在運(yùn)輸過程中未收到損壞。如果有損壞跡象,立即通知承運(yùn)人,并提出索賠。某些運(yùn)營商在交付的一定時(shí)間內(nèi),必須承擔(dān)賠償費(fèi)用。
1.包裝內(nèi)容
打開集裝箱檢查的內(nèi)容(見表1)。遺失物品報(bào)告。
表1 包裝清單
項(xiàng)目 |
內(nèi)容 |
數(shù)量 |
規(guī)格 |
1 |
蛋白循環(huán)反應(yīng)儀 |
1 |
寬 cm 高 cm 長 cm 重 kg |
2 |
產(chǎn)品說明書 |
1 |
|
3 |
電源線 |
1 |
最大電流 |
¨ 警告
不要在危險(xiǎn)環(huán)境下使用蛋白循環(huán)反應(yīng)儀。
若有液體溢出,請立即清理,以防止電擊。
如果有機(jī)械損壞的跡象,則不要繼續(xù)使用儀器。
2.使用前須知
蛋白循環(huán)反應(yīng)儀交付的所有主要組件已經(jīng)組裝,必須保持原有包裝組件的情況下,返回原廠修理。
儀器請平放在實(shí)驗(yàn)臺上,請勿傾斜放置或擺放在不平整的臺面上。
“電源開關(guān)”位于該裝置的左側(cè),此開關(guān)應(yīng)處于“關(guān)”位置,連接電源線到儀器上,正確的插好插頭,此時(shí)儀器就可以使用了。
3.可能需要的附加材料
(1)蛋白循環(huán)反應(yīng)試劑盒:分為6組和12組兩種型號。
(2)廢液吸取真空泵。
(3)洗滌緩沖液:PBS或TBS緩沖液。
二、儀器原理
該蛋白循環(huán)反應(yīng)儀采用的是本公司的核心技術(shù)——抗原-抗體循環(huán)反應(yīng)技術(shù),此技術(shù)能夠大大地加快抗原-抗體結(jié)合速度。當(dāng)用于醫(yī)療檢測中,可以縮短檢測反應(yīng)時(shí)間,增加檢測靈敏度,使得快速檢測更加快捷、準(zhǔn)確。基于抗體-抗原的檢測技術(shù),如酶聯(lián)免疫法(ELISA),穿流法(flow through),側(cè)流免疫層析法(lateral flow immunoassay),一般都包括一個(gè)溶液中的抗原與固定在一個(gè)支持體上的抗體結(jié)合的過程。這一過程一般需幾十分鐘到幾個(gè)小時(shí)才能完成。快速檢測方法,如側(cè)流免疫層析法,靈敏度低的一個(gè)重要原因就是抗原-抗體的不完全結(jié)合。循環(huán)反應(yīng)技術(shù)通過抗原-抗體反復(fù)、快速接觸,來實(shí)現(xiàn)充分、特異性的結(jié)合。圖1為此技術(shù)的示意圖。
圖1通過抗原-抗體循環(huán)技術(shù)方法將抗原抗體進(jìn)行最大化的結(jié)合
在此方法中,抗體被固定在一個(gè)硝酸纖維素膜或PVDF膜上,當(dāng)抗原溶液與膜孵育時(shí),抗原溶液在真空或壓力作用下,以類似一個(gè)過濾過程穿過膜。在此過程中,抗原與抗體有效結(jié)合。這一過程被自動(dòng)地重復(fù)多次以達(dá)到抗原-抗體的最大結(jié)合。因?yàn)檫@個(gè)循環(huán)過程非常快速,可以縮小抗原抗體反應(yīng)所需時(shí)間。清洗過程也是以這種類似過程完成,非常有效地去除非特異性結(jié)合的抗原。運(yùn)用抗原-抗體循環(huán)反應(yīng)技術(shù)可以將抗原-抗體結(jié)合過程從幾個(gè)小時(shí)縮短到幾分鐘,從而大大加快了蛋白質(zhì)檢測的速度。抗原-抗體循環(huán)反應(yīng)技術(shù)保證了抗原-抗體的最大結(jié)合,從而提高了檢測的靈敏度。
三、操作
請?jiān)诓僮鳈C(jī)器前熟悉機(jī)器,所有的操作通過手動(dòng)的電阻屏。
1.安裝反應(yīng)盒
將蛋白循環(huán)反應(yīng)盒按照對應(yīng)尺寸,安裝在反應(yīng)臺上。
2.程序界面介紹
打開儀器開關(guān)即可進(jìn)入以下界面,界面分為四個(gè)部分,分別是參數(shù)設(shè)置部分、狀態(tài)顯示部分、數(shù)值輸入部分和控制鍵部分。
(1)參數(shù)設(shè)置
a. Speed:設(shè)置反應(yīng)臺升降的快慢,設(shè)定范圍為0—10,建議設(shè)定速度為2或3。
b. Distance:設(shè)置反應(yīng)臺升降的距離,設(shè)定范圍為0—10,建議設(shè)定距離為5或6。
c. Cycles:設(shè)置反應(yīng)臺循環(huán)的次數(shù),反應(yīng)臺上下往返一次為一個(gè)循環(huán)。
(2)狀態(tài)顯示
a. Time Stared:顯示循環(huán)程序從開始運(yùn)行到目前的時(shí)間。
b. Time Lapsed:顯示離所有循環(huán)完成所需的時(shí)間。
c. Cycles Passed:顯示當(dāng)前已完成幾次循環(huán)操作。
(3)數(shù)值輸入
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,點(diǎn)擊數(shù)字輸入相應(yīng)的參數(shù)設(shè)定值,點(diǎn)擊“<”可清除光標(biāo)前一位的數(shù)字,點(diǎn)擊“CE”可清除當(dāng)前參數(shù)欄的所有數(shù)字。
(4)控制鍵:
a. Up:根據(jù)所設(shè)定的速度Speed,向上移動(dòng)設(shè)定的距離Distance。
b. Down:根據(jù)所設(shè)定的速度Speed,向下移動(dòng)設(shè)定的距離Distance。
c. Start:設(shè)定好三個(gè)程序參數(shù)后,點(diǎn)擊此鍵開始循環(huán)程序。反應(yīng)臺必須位于初始位置才能使用此鍵。
d. Stop:暫停正在進(jìn)行的循環(huán)程序,可以在任何時(shí)候暫停程序。
e. Resume:當(dāng)一個(gè)操作程序開始運(yùn)行后,因?yàn)槟承┰蚰鷷簳r(shí)停止了該操作,您可以從剛才停止的地方恢復(fù),繼續(xù)運(yùn)行未完成的操作程序。
f. Reset:讓機(jī)器回到初始狀態(tài), 只能在機(jī)器未運(yùn)行時(shí)進(jìn)行重置,機(jī)器運(yùn)行期間不能進(jìn)行重置。
注意:
¨ 打開機(jī)器后,請先將門關(guān)閉,再運(yùn)行操作,以防夾手。
¨ 在循環(huán)程序進(jìn)行的過程中,你可以隨時(shí)暫停操作,也可隨時(shí)恢復(fù)操作
3.具體操作
(1)設(shè)置運(yùn)行參數(shù)
a. 點(diǎn)擊Speed,設(shè)置反應(yīng)臺升降的速度,設(shè)定范圍為0—10,建議速度設(shè)置為2—3。
b. 點(diǎn)擊Distance,設(shè)置反應(yīng)臺升降的距離,設(shè)定范圍為0—10,建議反應(yīng)液體積為500ul時(shí)距離設(shè)置5或6。
c. 點(diǎn)擊Cycles,設(shè)置循環(huán)反應(yīng)次數(shù),反應(yīng)臺升降一次為一個(gè)循環(huán)。
(2)運(yùn)行程序
a. 設(shè)置以上參數(shù)后,點(diǎn)擊Up或Down,可讓反應(yīng)臺進(jìn)行單次上升或下降(Distance的數(shù)值);
b. 點(diǎn)擊Start,可讓反應(yīng)臺進(jìn)行已設(shè)定數(shù)量的循環(huán);
c. 在反應(yīng)臺進(jìn)行循環(huán)反應(yīng)的過程中,出現(xiàn)任何問題可以點(diǎn)擊Stop,立即暫停反應(yīng)臺的升降,如需繼續(xù)程序可點(diǎn)擊Resume;
d. 程序運(yùn)行完成后,點(diǎn)擊Reset,讓機(jī)器回復(fù)到初始狀態(tài);
e. 反應(yīng)的進(jìn)行時(shí)間和已運(yùn)行的循環(huán)次數(shù)可見界面上方右側(cè)的三個(gè)狀態(tài)欄。
4.舉例
(1)加待測血清:將已包被捕獲抗體的反應(yīng)盒安裝在機(jī)器上,加入待測血清500ul,設(shè)置Speed為2,Distance為5,Cycles為10。設(shè)置完成后點(diǎn)擊Start開始循環(huán)反應(yīng)。
(2)清洗:10次循環(huán)結(jié)束后,用廢液吸取真空泵將廢液吸去,再加入500ul PBS緩沖液,以同樣的Speed和Distance,每次3個(gè)循環(huán)進(jìn)行清洗,每次清洗完吸去廢液,共清洗3次。
(3)加hrp溶液:再加入500ul含有標(biāo)記hrp抗體的檢測液,以同樣的Speed和Distance進(jìn)行10次循環(huán)。
(4)清洗:同第2步操作。
(5)顯色:加入ECL化學(xué)發(fā)光底物或者TMB底物顯色液,觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
四、注意事項(xiàng)
1. 機(jī)器運(yùn)行過程中,請勿將門打開,防止手被夾傷。
2. 為防止觸電,非專業(yè)人員請勿打開機(jī)箱,否則會有電擊危險(xiǎn)。
3. 避免將設(shè)備暴露在日光直接照射下或其他熱源處,以免損壞敏感元件。
4. 避免受潮或雷電所引致的損壞,勿將本產(chǎn)品暴露在雨中或過分潮濕處使用。
5. 如遇不正常現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立刻停止使用本機(jī)。如:冒煙、聲音異常或異味。
6.當(dāng)您發(fā)現(xiàn)任何異常時(shí),應(yīng)立刻切斷電源開關(guān)及拔掉電源插頭。

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